Cílem této diplomové práce bylo pomocí Southernovy a northernové hybridizace analyzovat počet vnesených T-DNA nesoucích geny pmi a nptII a expresi genu pmi u transformantů rajčete. Pomocí PMI-assaye s acidobazickým indikátorem Chlorfenolová červeň byla posouzena přítomnost funkčního proteinu PMI v transgenních rostlinách rajčete. Byla úspěšně zavedena selekce semen rajčat T1 generace na manóze a pozorované fenotypové štěpné poměry byly analyzovány.
Anotace v angličtině
The aim of this study was to analyze number of incorporated T-DNA harbouring pmi and nptII transgenes and expression of the pmi gene in tomato transformants using Southern blot and Northern blot methods. The presence of a functional PMI protein was assesed using PMI-assay with Chlorophenol red dye. Mannose selection of tomato seeds was established and segregation patterns in T1 progeny were studied.
Klíčová slova
Lycopersicon esculentum, gen pmi, nptII, selekce na manóze, selekce na kanamycinu, T1 generace, PMI-assay, transgen, Chlorfenolová červeň
Klíčová slova v angličtině
Lycopersicon esculentum, pmi, nptII, mannose selection, kanamycin selection, transgene, TI progeny, PMI-assay, Chlorophenol red
Rozsah průvodní práce
53 s., 2 s. obr. příloh
Jazyk
CZ
Anotace
Cílem této diplomové práce bylo pomocí Southernovy a northernové hybridizace analyzovat počet vnesených T-DNA nesoucích geny pmi a nptII a expresi genu pmi u transformantů rajčete. Pomocí PMI-assaye s acidobazickým indikátorem Chlorfenolová červeň byla posouzena přítomnost funkčního proteinu PMI v transgenních rostlinách rajčete. Byla úspěšně zavedena selekce semen rajčat T1 generace na manóze a pozorované fenotypové štěpné poměry byly analyzovány.
Anotace v angličtině
The aim of this study was to analyze number of incorporated T-DNA harbouring pmi and nptII transgenes and expression of the pmi gene in tomato transformants using Southern blot and Northern blot methods. The presence of a functional PMI protein was assesed using PMI-assay with Chlorophenol red dye. Mannose selection of tomato seeds was established and segregation patterns in T1 progeny were studied.
Klíčová slova
Lycopersicon esculentum, gen pmi, nptII, selekce na manóze, selekce na kanamycinu, T1 generace, PMI-assay, transgen, Chlorfenolová červeň
Klíčová slova v angličtině
Lycopersicon esculentum, pmi, nptII, mannose selection, kanamycin selection, transgene, TI progeny, PMI-assay, Chlorophenol red