Hlavním tématem této bakalářské práce je bakterie Helicobacter pylori (HP), její výskyt v žaludeční sliznici a způsob její diagnostiky v laboratoři pomocí histologického a imunohistochemického vyšetření.
V teoretické části se zabývám samotnou bakterií, její morfologií a hlavně diagnostikou. Způsobů, jak zjistit přítomnost této bakterie, je mnoho, nejčastější rozdělení je na invazivní testy, kam řadíme histologické vyšetření, kultivaci a ureázový test, a neinvazivní testy, kde můžeme využít sérologii a dechové testy. Popisuji zde také anatomii a histologickou stavbu žaludku a poté navazuji na patologii žaludku, kde jsem se zaměřila na nejčastější onemocnění způsobené Helicobacterem pylori, akutní a chronické gastritidy a nádory žaludku. Je zde zahrnut celý proces histologického vyšetření, od příjmu vzorku na oddělení, přes fixaci s příklady různých fixačních prostředků, k zalévání, krájení a barvení, kde popisuji i druhy barvení, které jsou využité v praktické části. Na konci teoretické části se zabývám i tématem imunohistochemie.
Jedním z cílů praktické části je osvojení si základního rutinního barvení Hematoxylin eosin, speciálního barvení Giemsa a imunohistochemického vyšetření antigenu pomocí polyklonální protilátky Anti-Helicobacter pylori. Dalším cílem je zmapování výskytu infekce Helicobacter pylori dle věkových skupin, pohlaví vyšetřovaných pacientů a ročního období. Stanovila jsem si dvě výzkumné otázky, které bych ráda zodpověděla.
Výsledky vyšetření 38 žaludečních biopsií získaných v roce 2022 budou statisticky zpracovány a doplněny mikrofotografiemi vybraných vzorků.
Anotace v angličtině
The main topic of this bachelor thesis is the bacterium Helicobacter pylori, its occurrence in the gastric mucosa, and the metod of its diagnosis in the laboratory using histological and immunohistochemical examination.
In the theoretical part, I describe the bacterium itself, its morphology and mainly its diagnostics. There are many ways to detect the presence of this bacterium, most commonly divided into invasive tests, which include histological examination, cultivation and urease test, and non-invasive, where we can use serological and breathing tests. I also describe the anatomy and histological structure of the stomach in this part. Then I follow up on stomach pathology, where I focused on the most common diseases caused by Helicobacter pylori, acute and chronic gastritis and stomach tumors. The over-all histological examination is also included, its parts being receiving the sample to the department through fixation with examples of various fixation agents, to embedding, cutting and staining, where I also describe the types of staining that are used in the practical part. I also deal with the topic of immunohistochemistry.
One of the goals of the practical part is to master the basic routine Hematoxylin eosin staining, special Giemsa staining and immunohistochemical examination of the antigen using the Anti-Helicobacter pylori polyclonal antibody. Another goal is to map the occurrence of Helicobacter pylori infection based on age groups, sex of examined patients and season. I set two research questions that I would like to answer.
Results obtained in the year 2022 will be statistically processed and supplemented with photomicrographs of selected samples.
Hlavním tématem této bakalářské práce je bakterie Helicobacter pylori (HP), její výskyt v žaludeční sliznici a způsob její diagnostiky v laboratoři pomocí histologického a imunohistochemického vyšetření.
V teoretické části se zabývám samotnou bakterií, její morfologií a hlavně diagnostikou. Způsobů, jak zjistit přítomnost této bakterie, je mnoho, nejčastější rozdělení je na invazivní testy, kam řadíme histologické vyšetření, kultivaci a ureázový test, a neinvazivní testy, kde můžeme využít sérologii a dechové testy. Popisuji zde také anatomii a histologickou stavbu žaludku a poté navazuji na patologii žaludku, kde jsem se zaměřila na nejčastější onemocnění způsobené Helicobacterem pylori, akutní a chronické gastritidy a nádory žaludku. Je zde zahrnut celý proces histologického vyšetření, od příjmu vzorku na oddělení, přes fixaci s příklady různých fixačních prostředků, k zalévání, krájení a barvení, kde popisuji i druhy barvení, které jsou využité v praktické části. Na konci teoretické části se zabývám i tématem imunohistochemie.
Jedním z cílů praktické části je osvojení si základního rutinního barvení Hematoxylin eosin, speciálního barvení Giemsa a imunohistochemického vyšetření antigenu pomocí polyklonální protilátky Anti-Helicobacter pylori. Dalším cílem je zmapování výskytu infekce Helicobacter pylori dle věkových skupin, pohlaví vyšetřovaných pacientů a ročního období. Stanovila jsem si dvě výzkumné otázky, které bych ráda zodpověděla.
Výsledky vyšetření 38 žaludečních biopsií získaných v roce 2022 budou statisticky zpracovány a doplněny mikrofotografiemi vybraných vzorků.
Anotace v angličtině
The main topic of this bachelor thesis is the bacterium Helicobacter pylori, its occurrence in the gastric mucosa, and the metod of its diagnosis in the laboratory using histological and immunohistochemical examination.
In the theoretical part, I describe the bacterium itself, its morphology and mainly its diagnostics. There are many ways to detect the presence of this bacterium, most commonly divided into invasive tests, which include histological examination, cultivation and urease test, and non-invasive, where we can use serological and breathing tests. I also describe the anatomy and histological structure of the stomach in this part. Then I follow up on stomach pathology, where I focused on the most common diseases caused by Helicobacter pylori, acute and chronic gastritis and stomach tumors. The over-all histological examination is also included, its parts being receiving the sample to the department through fixation with examples of various fixation agents, to embedding, cutting and staining, where I also describe the types of staining that are used in the practical part. I also deal with the topic of immunohistochemistry.
One of the goals of the practical part is to master the basic routine Hematoxylin eosin staining, special Giemsa staining and immunohistochemical examination of the antigen using the Anti-Helicobacter pylori polyclonal antibody. Another goal is to map the occurrence of Helicobacter pylori infection based on age groups, sex of examined patients and season. I set two research questions that I would like to answer.
Results obtained in the year 2022 will be statistically processed and supplemented with photomicrographs of selected samples.
Helicobacter pylori (HP) způsobuje chronickou bakteriální infekci člověka s prokázaným onkogenním potenciálem. Více než polovina světové populace je touto bakterií infikována. Prevalence HP reflektuje úroveň urbanizace, hygieny a přístupu k čisté vodě. Zároveň má signifikantní socioekonomické dopady a z toho také vyplývá i značný zájem o včasnou detekci a eradikaci HP.
2) Cíl práce:
1. Porovnání použitých metod vyšetření (Hematoxylin Eosin, barvení dle Giemsa, imunohistochemické vyšetření antigenu pomocí primární protilátky anti-Helicobacter pylori) a jejich osvojení.
2. Zmapování výskytu HP v souboru vyšetřovaných pacientů za dané období (věkové skupiny, pohlaví zkoumaných subjektů s přihlédnutím k ročním obdobím).
3) Hypotézy nebo výzkumné otázky:
1. Je speciální barvení dle Giemsa dostatečně citlivou a snadno použitelnou metodou v detekci přítomnosti HP v rutinní diagnostice?
2. Poskytuje barvení dle Giemsa srovnatelné výsledky jako imunohistochemická metoda pomocí protilátky anti-Helicobacter pylori k identifikaci této bakterie v histologii?
4) Popis metodiky:
Do souboru budou zařazeny a statisticky hodnoceny všechny žaludeční biopsie vyšetřené během období zpracování této bakalářské práce na Oddělení patologicko - anatomickém, Nemocnice Písek, a.s. Budu samostatně zpracovávat vzorky žaludečních biopsií nejprve histologicky. Formolem fixované parafinové bloky žaludečních biopsií se obarví základním barvením Hematoxylin eosin. Pokud bude po mikroskopickém hodnocení ve vzorcích přítomen floridní zánět, u těchto vzorků se následně zhotoví 2 preparáty, které se obarví metodou dle Giemsa a provede se imunohistochemické vyšetření antigenu k detekci HP.
5) Předpokládané využití práce v praxi:
Možnost zavedení speciální barvící metody dle Giemsa do rutinní praxe jako optimální metody pro detekci Helicobactera pylori na Oddělení patologicko-anatomickém, Nemocnice Písek, a.s. Bakalářská práce by mohla být dobrým základem pro další výzkum.
Zásady pro vypracování
1) Současný stav dané problematiky:
Helicobacter pylori (HP) způsobuje chronickou bakteriální infekci člověka s prokázaným onkogenním potenciálem. Více než polovina světové populace je touto bakterií infikována. Prevalence HP reflektuje úroveň urbanizace, hygieny a přístupu k čisté vodě. Zároveň má signifikantní socioekonomické dopady a z toho také vyplývá i značný zájem o včasnou detekci a eradikaci HP.
2) Cíl práce:
1. Porovnání použitých metod vyšetření (Hematoxylin Eosin, barvení dle Giemsa, imunohistochemické vyšetření antigenu pomocí primární protilátky anti-Helicobacter pylori) a jejich osvojení.
2. Zmapování výskytu HP v souboru vyšetřovaných pacientů za dané období (věkové skupiny, pohlaví zkoumaných subjektů s přihlédnutím k ročním obdobím).
3) Hypotézy nebo výzkumné otázky:
1. Je speciální barvení dle Giemsa dostatečně citlivou a snadno použitelnou metodou v detekci přítomnosti HP v rutinní diagnostice?
2. Poskytuje barvení dle Giemsa srovnatelné výsledky jako imunohistochemická metoda pomocí protilátky anti-Helicobacter pylori k identifikaci této bakterie v histologii?
4) Popis metodiky:
Do souboru budou zařazeny a statisticky hodnoceny všechny žaludeční biopsie vyšetřené během období zpracování této bakalářské práce na Oddělení patologicko - anatomickém, Nemocnice Písek, a.s. Budu samostatně zpracovávat vzorky žaludečních biopsií nejprve histologicky. Formolem fixované parafinové bloky žaludečních biopsií se obarví základním barvením Hematoxylin eosin. Pokud bude po mikroskopickém hodnocení ve vzorcích přítomen floridní zánět, u těchto vzorků se následně zhotoví 2 preparáty, které se obarví metodou dle Giemsa a provede se imunohistochemické vyšetření antigenu k detekci HP.
5) Předpokládané využití práce v praxi:
Možnost zavedení speciální barvící metody dle Giemsa do rutinní praxe jako optimální metody pro detekci Helicobactera pylori na Oddělení patologicko-anatomickém, Nemocnice Písek, a.s. Bakalářská práce by mohla být dobrým základem pro další výzkum.
Seznam doporučené literatury
DABBS, D., 2006. Diagnostic Immunohistochemistry. Second edition. London: Churchill Livingstone. ISBN 0-443-06652-3.
HOOI, J.K.Y. et al., 2017. Global Prevalence of Helicobacter pylori Infection: Systematic Review and Meta-Analysis. Gastroenterology [online]. 153(2), 420-429 [cit. 2022-4-10]. DOI: 10.1053/j.gastro.2017.04.022. ISSN 00165085. Dostupné z: https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0016508517355312
JIRKOVSKÁ, M., 2006. Histologická technika: pro studenty lékařství a zdravotnické techniky. Praha: Galén. ISBN 978-80-7262-263-4.
KONRÁDOVÁ, V., UHLÍK, J., VAJNER, L., 2000. Funkční histologie. 2. vyd. Jinočany: H & H. ISBN 80-86022-80-3.
VACEK, Z., 1996. Histologie a histologická technika II. část. Brno: Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví, 185 s. ISBN 80-7013-202-7.
DABBS, D., 2006. Diagnostic Immunohistochemistry. Second edition. London: Churchill Livingstone. ISBN 0-443-06652-3.
HOOI, J.K.Y. et al., 2017. Global Prevalence of Helicobacter pylori Infection: Systematic Review and Meta-Analysis. Gastroenterology [online]. 153(2), 420-429 [cit. 2022-4-10]. DOI: 10.1053/j.gastro.2017.04.022. ISSN 00165085. Dostupné z: https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0016508517355312
JIRKOVSKÁ, M., 2006. Histologická technika: pro studenty lékařství a zdravotnické techniky. Praha: Galén. ISBN 978-80-7262-263-4.
KONRÁDOVÁ, V., UHLÍK, J., VAJNER, L., 2000. Funkční histologie. 2. vyd. Jinočany: H & H. ISBN 80-86022-80-3.
VACEK, Z., 1996. Histologie a histologická technika II. část. Brno: Institut pro další vzdělávání pracovníků ve zdravotnictví, 185 s. ISBN 80-7013-202-7.