Cílem této práce bylo sledovat a zaznamenat, jaký vliv má infekce žaludečními druhy rodu Cryptosporidium na vlastnosti žaludku svých hostitelů. Pro sérii experimentálních infekcí byl použit druh Cryptosporidium proliferans, jako experimentální zvířata byly použity tři typy modelových hostitelů - myši typu BALB/c, C57Bl6 a mastomyši (Mastomys coucha). Standardními parazitologickými, specificky barvicími a molekulárními metodami byly detekovány oocysty v trusu infikovaných zvířat a byl popsán průběh infekce a patogenita daného druhu Cryptosporidium. Skupiny zvířat zahrnující 1-3 kusy byly humánně zabíjeny v sedmidenních intervalech až do 70 dnů po infekci. Bylo zjištěno, že C. proliferans má u vybraných typů hostitelů přímý vliv na změnu pH, kdy dochází k jeho zvýšení ve vrcholu infekce a v závislosti na typu hostitele buďto k jeho zvyšování do konce experimentu, anebo v případě samovyléčení k jeho postupnému návratu na fyziologické hodnoty. Histologickými metodami byly v průběhu infekce zaznamenány patologické změny sliznice žaludku, kterými bylo její zesílení a zvýšená tvorba hlenu, dále přítomnost zánětlivých infiltrátů a intenzita infekce, a to v různém rozsahu napříč vybranými hostiteli a průběhem infekce. Zjistili jsme, že i v případě krátkodobé infekce u BALB/c a C57Bl6 myší dochází ke zvětšení i zesílení sliznice, přestože u těchto typů myší patologické změny nejsou tak rozsáhlé, jako v případě mastomyší, u nichž nedochází k samovyléčení.
Anotace v angličtině
The aim of this study was to observe and record the effect of infection with gastric species of the genus Cryptosporidium on the gastric characteristics of their hosts. The species Cryptosporidium proliferans was used for a series of experimental infections, and three types of model hosts - BALB/c mice, C57Bl6 mice and multimammate mice (Mastomys coucha) - were used as experimental animals. Oocysts were detected in the faeces of infected animals by standard parasitological, specific staining and molecular methods and the course of infection and pathogenicity of the Cryptosporidium species were described. Groups of animals comprising of 1-3 animals were humanely euthanized at seven-day intervals up to 70 days after infection. C. proliferans was found to have a direct effect on pH change in selected host types, with an increase in pH at the peak of infection and, depending on the host type, either an increase until the
end of the experiment or, in the case of self-healing, a gradual return to physiological values. Pathological changes of the gastric mucosa during the course of the infection were recorded by histological methods, which were its thickening and increased mucus production, as well as the presence of inflammatory infiltrates and the intensity of the infection, to varying degrees across the selected hosts and the course of the infection. We found that even with short-term infection in BALB/c and C57Bl6 mice, there is both mucosal enlargement and thickening, although the pathological changes in these types of mice are not as extensive as in multimammate mice, which do not self-heal.
Cílem této práce bylo sledovat a zaznamenat, jaký vliv má infekce žaludečními druhy rodu Cryptosporidium na vlastnosti žaludku svých hostitelů. Pro sérii experimentálních infekcí byl použit druh Cryptosporidium proliferans, jako experimentální zvířata byly použity tři typy modelových hostitelů - myši typu BALB/c, C57Bl6 a mastomyši (Mastomys coucha). Standardními parazitologickými, specificky barvicími a molekulárními metodami byly detekovány oocysty v trusu infikovaných zvířat a byl popsán průběh infekce a patogenita daného druhu Cryptosporidium. Skupiny zvířat zahrnující 1-3 kusy byly humánně zabíjeny v sedmidenních intervalech až do 70 dnů po infekci. Bylo zjištěno, že C. proliferans má u vybraných typů hostitelů přímý vliv na změnu pH, kdy dochází k jeho zvýšení ve vrcholu infekce a v závislosti na typu hostitele buďto k jeho zvyšování do konce experimentu, anebo v případě samovyléčení k jeho postupnému návratu na fyziologické hodnoty. Histologickými metodami byly v průběhu infekce zaznamenány patologické změny sliznice žaludku, kterými bylo její zesílení a zvýšená tvorba hlenu, dále přítomnost zánětlivých infiltrátů a intenzita infekce, a to v různém rozsahu napříč vybranými hostiteli a průběhem infekce. Zjistili jsme, že i v případě krátkodobé infekce u BALB/c a C57Bl6 myší dochází ke zvětšení i zesílení sliznice, přestože u těchto typů myší patologické změny nejsou tak rozsáhlé, jako v případě mastomyší, u nichž nedochází k samovyléčení.
Anotace v angličtině
The aim of this study was to observe and record the effect of infection with gastric species of the genus Cryptosporidium on the gastric characteristics of their hosts. The species Cryptosporidium proliferans was used for a series of experimental infections, and three types of model hosts - BALB/c mice, C57Bl6 mice and multimammate mice (Mastomys coucha) - were used as experimental animals. Oocysts were detected in the faeces of infected animals by standard parasitological, specific staining and molecular methods and the course of infection and pathogenicity of the Cryptosporidium species were described. Groups of animals comprising of 1-3 animals were humanely euthanized at seven-day intervals up to 70 days after infection. C. proliferans was found to have a direct effect on pH change in selected host types, with an increase in pH at the peak of infection and, depending on the host type, either an increase until the
end of the experiment or, in the case of self-healing, a gradual return to physiological values. Pathological changes of the gastric mucosa during the course of the infection were recorded by histological methods, which were its thickening and increased mucus production, as well as the presence of inflammatory infiltrates and the intensity of the infection, to varying degrees across the selected hosts and the course of the infection. We found that even with short-term infection in BALB/c and C57Bl6 mice, there is both mucosal enlargement and thickening, although the pathological changes in these types of mice are not as extensive as in multimammate mice, which do not self-heal.
Kryptosporidie jsou celosvětově rozšíření jednobuněční paraziti infikující všechny třídy obratlovců.
Na základě studia biologie kryptosporidií je známo, že vývoj jednotlivých druhů a genotypů je vázán téměř výhradně na určité části zažívací soustavy.
Druhy infikující žláznatý žaludek hostitelů jsou obecně považovány za málo patogenní.
Nicméně u některých hostitelů byly zaznamenány výrazné patologické změny sliznice a změna pH.
Cílem práce je pomocí série experimentálních infekcí popsat patogenitu, změnu pH žaludku a průběh infekce různých druhů a genotypů žaludečních kryptosporidií savců u modelových hostitelů.
Pomocí standardních parazitologických, specifických barvicích a molekulárních metod detekujte oocysty v trusu experimentálně infikovaných zvířat, popište průběh infekce.
Pomocí histologických metod charakterizujte patologické změny sliznice žaludku v průběhu infekce a dále popište změny pH žaludku v různých fázích infekce.
Datové soubory zpracujete příslušnými statistickými metodami a výsledky porovnejte s literaturou.
Zásady pro vypracování
Kryptosporidie jsou celosvětově rozšíření jednobuněční paraziti infikující všechny třídy obratlovců.
Na základě studia biologie kryptosporidií je známo, že vývoj jednotlivých druhů a genotypů je vázán téměř výhradně na určité části zažívací soustavy.
Druhy infikující žláznatý žaludek hostitelů jsou obecně považovány za málo patogenní.
Nicméně u některých hostitelů byly zaznamenány výrazné patologické změny sliznice a změna pH.
Cílem práce je pomocí série experimentálních infekcí popsat patogenitu, změnu pH žaludku a průběh infekce různých druhů a genotypů žaludečních kryptosporidií savců u modelových hostitelů.
Pomocí standardních parazitologických, specifických barvicích a molekulárních metod detekujte oocysty v trusu experimentálně infikovaných zvířat, popište průběh infekce.
Pomocí histologických metod charakterizujte patologické změny sliznice žaludku v průběhu infekce a dále popište změny pH žaludku v různých fázích infekce.
Datové soubory zpracujete příslušnými statistickými metodami a výsledky porovnejte s literaturou.
Seznam doporučené literatury
Fayer R, Xiao L (2007) Cryptosporidium and Cryptosporidiosis; Fayer R, editor. New York: CRC Press. 560 p.
Kváč M, et al. (2016) Cryptosporidium proliferans n. sp. (Apicomplexa: Cryptosporidiidae): Molecular and biological evidence of cryptic species within gastric Cryptosporidium of mammals. PLoS One 11: e0147090.
Lindsay DS, et al. (2000) Cryptosporidium andersoni n. sp. (Apicomplexa: Cryptosporiidae) from cattle, Bos taurus. Journal of Eukaryotic Microbiology 47:91-95.
Matsubayashi M, et al. (2011) Effect of low pH on the morphology and viability of Cryptosporidium andersoni sporozoites and histopathology in the stomachs of infected mice. Internatioal Journal of Parasitology 41:287-292.
Seznam doporučené literatury
Fayer R, Xiao L (2007) Cryptosporidium and Cryptosporidiosis; Fayer R, editor. New York: CRC Press. 560 p.
Kváč M, et al. (2016) Cryptosporidium proliferans n. sp. (Apicomplexa: Cryptosporidiidae): Molecular and biological evidence of cryptic species within gastric Cryptosporidium of mammals. PLoS One 11: e0147090.
Lindsay DS, et al. (2000) Cryptosporidium andersoni n. sp. (Apicomplexa: Cryptosporiidae) from cattle, Bos taurus. Journal of Eukaryotic Microbiology 47:91-95.
Matsubayashi M, et al. (2011) Effect of low pH on the morphology and viability of Cryptosporidium andersoni sporozoites and histopathology in the stomachs of infected mice. Internatioal Journal of Parasitology 41:287-292.