Hodnocení subchronického působení atrazinu na raka Cherax destructor
Cílem této studie bylo zhodnotit vliv subchronického působení atrazinu na chování, hladinu oxidativního stresu, aktivitu antioxidačních biomarkerů a biochemický profil hemolymfy raka ničivého a tím doplnit stávající informace pro posouzení vlivu této látky na životní prostředí.
Celková doba trvání testu byla 28 dní, během prvních 14 dní byli raci vystaveni dvěma koncentracím atrazinu: 6,86 mikrogramů na litr (ATRenv = environmentální koncentrace zjištěná v povrchové vodě České republiky) a 1,21 miligramů na litr (ATR10% = odpovídá 10% 96hLC50) následovaných 14denní zotavovací fází v čisté vodě bez chemické látky.
Subchronické působení atrazinu neprokázalo vliv na chování raků a na hladinu oxidativního stresu (měřenou pomocí TBARS). Naproti tomu subchronické působení atrazinu vyvolalo změny v aktivitě antioxidačních enzymů (tkáně hepatopankreatu, svalu a žaber) sledovaných raků, kdy byly pozorovány změny aktivity superoxiddismutázy (SOD) ve všech tkáních. Dále pak byly změny aktivity prokázány u katalázy (CAT; tkáně hepatopankreatu a svalu), glutathionu S-transferázy (tkáně hepatopankreatu a žaber), u glutathionreaduktázy (GR) (hepatopankreas) a redukovaného glutathionu (sval). Koncentrace ATRenv měla vliv na biochemický profil hemolymfy u následujících parametrů laktát a alkalická fosfatáza, naproti tomu vliv ATR10% byl prokázán u glukózy, amoniaku, laktátu a alkalické fosfatázy.
Výsledky představené touto studií doplňují informace o vlivu atrazinu na raky a na životní prostředí jako celek. Společně se jeví jako ideální nástroj pro hodnocení testů toxicity při užití triazinových herbicidů.
Anotace v angličtině
The evaluation of the sub-chronic exposure to atrazine on crayfish
The aim of this study is to evaluate the sub-chronic effect of atrazin on a behaviour, oxidative stress, antioxidant enzyme aktivities and biochemical profile of haemolymph in. These complex data should help to appraise the impact of this substance in the environment.
The total test duration was 28 days and was divided into two periods. The first 14 days the crayfish were exposed to two concentrations of atrazine: 6.86 micrograms per liter (ATRenv = environmental concentration in the water in the Czech Republic) and 1.21 milligrams per liter (ATR10% = is coincident to 10% LC50). After the atrazine treatments the depuration 2 weeks phases in water without any chemicals followed.
The results indicate that sub-chronic effect of atrazine influenced neither the behaviour of the crayfish nor the level of oxidative stress (measured by TBARS), whereas the changes of superoxiddismutase (SOD) were observed in all tissues (muscles, gills and hepatopancreas). The changes of enzyme activity were observed in catalase (CAT; hepatopancreas and the muscle tissue), glutathione S-transferase (hepatopancreas and the gills tissue), glutathione reductase (GR; the hepatopancreas tissue) and reduced glutathione (the muscle tissue). The influence of ATRenv on the biochemical profile of haemolymph at the following parameters was estimated only for lactate and alkaline, however phosphatase changes made by ATR10% were significant for glucose, ammonia, lactate and alkaline phosphatase measurements. The sub-chronical effect changed the activity of all antioxidant enzymes in hepatopancreas, muscles and the gills tissue of the observed crayfish.
The presented results in this study are giving compact information of impact of atrazine on the crayfish and the whole water environment. The suggestion of using the crayfish for tests of toxicity looks like an ideal supplement for triazine herbicide estimations.
Hodnocení subchronického působení atrazinu na raka Cherax destructor
Cílem této studie bylo zhodnotit vliv subchronického působení atrazinu na chování, hladinu oxidativního stresu, aktivitu antioxidačních biomarkerů a biochemický profil hemolymfy raka ničivého a tím doplnit stávající informace pro posouzení vlivu této látky na životní prostředí.
Celková doba trvání testu byla 28 dní, během prvních 14 dní byli raci vystaveni dvěma koncentracím atrazinu: 6,86 mikrogramů na litr (ATRenv = environmentální koncentrace zjištěná v povrchové vodě České republiky) a 1,21 miligramů na litr (ATR10% = odpovídá 10% 96hLC50) následovaných 14denní zotavovací fází v čisté vodě bez chemické látky.
Subchronické působení atrazinu neprokázalo vliv na chování raků a na hladinu oxidativního stresu (měřenou pomocí TBARS). Naproti tomu subchronické působení atrazinu vyvolalo změny v aktivitě antioxidačních enzymů (tkáně hepatopankreatu, svalu a žaber) sledovaných raků, kdy byly pozorovány změny aktivity superoxiddismutázy (SOD) ve všech tkáních. Dále pak byly změny aktivity prokázány u katalázy (CAT; tkáně hepatopankreatu a svalu), glutathionu S-transferázy (tkáně hepatopankreatu a žaber), u glutathionreaduktázy (GR) (hepatopankreas) a redukovaného glutathionu (sval). Koncentrace ATRenv měla vliv na biochemický profil hemolymfy u následujících parametrů laktát a alkalická fosfatáza, naproti tomu vliv ATR10% byl prokázán u glukózy, amoniaku, laktátu a alkalické fosfatázy.
Výsledky představené touto studií doplňují informace o vlivu atrazinu na raky a na životní prostředí jako celek. Společně se jeví jako ideální nástroj pro hodnocení testů toxicity při užití triazinových herbicidů.
Anotace v angličtině
The evaluation of the sub-chronic exposure to atrazine on crayfish
The aim of this study is to evaluate the sub-chronic effect of atrazin on a behaviour, oxidative stress, antioxidant enzyme aktivities and biochemical profile of haemolymph in. These complex data should help to appraise the impact of this substance in the environment.
The total test duration was 28 days and was divided into two periods. The first 14 days the crayfish were exposed to two concentrations of atrazine: 6.86 micrograms per liter (ATRenv = environmental concentration in the water in the Czech Republic) and 1.21 milligrams per liter (ATR10% = is coincident to 10% LC50). After the atrazine treatments the depuration 2 weeks phases in water without any chemicals followed.
The results indicate that sub-chronic effect of atrazine influenced neither the behaviour of the crayfish nor the level of oxidative stress (measured by TBARS), whereas the changes of superoxiddismutase (SOD) were observed in all tissues (muscles, gills and hepatopancreas). The changes of enzyme activity were observed in catalase (CAT; hepatopancreas and the muscle tissue), glutathione S-transferase (hepatopancreas and the gills tissue), glutathione reductase (GR; the hepatopancreas tissue) and reduced glutathione (the muscle tissue). The influence of ATRenv on the biochemical profile of haemolymph at the following parameters was estimated only for lactate and alkaline, however phosphatase changes made by ATR10% were significant for glucose, ammonia, lactate and alkaline phosphatase measurements. The sub-chronical effect changed the activity of all antioxidant enzymes in hepatopancreas, muscles and the gills tissue of the observed crayfish.
The presented results in this study are giving compact information of impact of atrazine on the crayfish and the whole water environment. The suggestion of using the crayfish for tests of toxicity looks like an ideal supplement for triazine herbicide estimations.
Cílem diplomové práce je posoudit subchronické účinky atrazinu na raka Cherax destructor.
V rámci diplomové práce bude proveden subchronický test toxicity na raku Cherax destructor s atrazinem. Během testu se bude sledovat vliv atrazinu na mortalitu, změny v chování, biochemický profil hemolymfy, antioxidační biomarkery a oxidační stres v tkáních raka Cherax destructor. Po skončení subchronické expozice atrazinu budou raci drženi dalších několik dnů v čisté vodě bez testované látky pro sledování zotavení a znovuobnovení vybraných biochemických ukazatelů exponovaných raků.
Metodicky bude postupováno podle platných standardních operačních postupů, které byly zpracovány akreditovanou laboratoří vodní toxikologie a ichtyopatologie na FROV JU. Tyto postupy vycházejí z norem OECD a ISO pro testy toxicity na zástupcích vodních organismů. Biochemický profil hemolymfy, antioxidační biomarkery, oxidační stres v tkáních raka Cherax destructor budou prováděny dle jednotlivých metod.
Získané výsledky testování rozšíří dosavadní informace o nové poznatky o toxickém vlivu atrazinu na necílové vodní organismy, respektive raky, a budou podkladem pro hodnocení rizik atrazinu pro životní prostředí (Environmental Risk Assessment).
Zásady pro vypracování
Cílem diplomové práce je posoudit subchronické účinky atrazinu na raka Cherax destructor.
V rámci diplomové práce bude proveden subchronický test toxicity na raku Cherax destructor s atrazinem. Během testu se bude sledovat vliv atrazinu na mortalitu, změny v chování, biochemický profil hemolymfy, antioxidační biomarkery a oxidační stres v tkáních raka Cherax destructor. Po skončení subchronické expozice atrazinu budou raci drženi dalších několik dnů v čisté vodě bez testované látky pro sledování zotavení a znovuobnovení vybraných biochemických ukazatelů exponovaných raků.
Metodicky bude postupováno podle platných standardních operačních postupů, které byly zpracovány akreditovanou laboratoří vodní toxikologie a ichtyopatologie na FROV JU. Tyto postupy vycházejí z norem OECD a ISO pro testy toxicity na zástupcích vodních organismů. Biochemický profil hemolymfy, antioxidační biomarkery, oxidační stres v tkáních raka Cherax destructor budou prováděny dle jednotlivých metod.
Získané výsledky testování rozšíří dosavadní informace o nové poznatky o toxickém vlivu atrazinu na necílové vodní organismy, respektive raky, a budou podkladem pro hodnocení rizik atrazinu pro životní prostředí (Environmental Risk Assessment).
Seznam doporučené literatury
Velíšek, J., Svobodová, Z., Blahová, J., Máchová, J., Stará, A., Dobšíková, R., Široká, Z., Modrá, H., Valentová, O., Randák, T., Štěpánová, S., Kocour Kroupová, H., Maršálek, P., Grabic, R., Zusková, E., Bartošková, M., Stancová, V., 2014. Vodní toxikologie pro rybáře. FROV JU, Vodňany, 600 s.
Velisek, J, Stara, A., Svobodova, Z., 2011. The effects of pyrethroid and trazine pesticides on fish physiology. In: Pesticides in the Modern World - Pests Control and Pesticides Exposure and Toxicity Assessment. Stoytcheva, M., (Ed.). InTech. pp. 377-402.
Rudneva I., 2014. Biomarkers for stress in fish embryos and larvae. Boca Raton: CRC Press, Taylor & Francis Group, 204 p.
Stará, A., Kouba, A., Velíšek, J., 2014. Effect of chronic exposure to prometryne on oxidative stress and antioxidant response in red swamp crayfish (Procambarus clarkii). BioMed Research International, 6 p.
Stara, A., Zuskova E., Kouba, A., Velisek, J., 2016. Effects of terbuthylazine-desethyl, a terbuthylazine degradation product, on red swamp crayfish (Procambarus clarkii). Science of the Total Environment 566/567: 733-740.
Velíšek, J., Kouba, A., Stará, A., 2013. Acute toxicity of triazine pesticides to juvenile signal crayfish (Pacifastacus leniusculus), Neuroendocrinology Letters 34: 31-36.
Seznam doporučené literatury
Velíšek, J., Svobodová, Z., Blahová, J., Máchová, J., Stará, A., Dobšíková, R., Široká, Z., Modrá, H., Valentová, O., Randák, T., Štěpánová, S., Kocour Kroupová, H., Maršálek, P., Grabic, R., Zusková, E., Bartošková, M., Stancová, V., 2014. Vodní toxikologie pro rybáře. FROV JU, Vodňany, 600 s.
Velisek, J, Stara, A., Svobodova, Z., 2011. The effects of pyrethroid and trazine pesticides on fish physiology. In: Pesticides in the Modern World - Pests Control and Pesticides Exposure and Toxicity Assessment. Stoytcheva, M., (Ed.). InTech. pp. 377-402.
Rudneva I., 2014. Biomarkers for stress in fish embryos and larvae. Boca Raton: CRC Press, Taylor & Francis Group, 204 p.
Stará, A., Kouba, A., Velíšek, J., 2014. Effect of chronic exposure to prometryne on oxidative stress and antioxidant response in red swamp crayfish (Procambarus clarkii). BioMed Research International, 6 p.
Stara, A., Zuskova E., Kouba, A., Velisek, J., 2016. Effects of terbuthylazine-desethyl, a terbuthylazine degradation product, on red swamp crayfish (Procambarus clarkii). Science of the Total Environment 566/567: 733-740.
Velíšek, J., Kouba, A., Stará, A., 2013. Acute toxicity of triazine pesticides to juvenile signal crayfish (Pacifastacus leniusculus), Neuroendocrinology Letters 34: 31-36.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka Bc. Markéta Hlávková seznámila komisi se svou diplomovou prací.
Tajemník komise, doc. Ing. Martin Kocour, Ph.D., seznámil komisi s posudkem vedoucího a oponenta diplomové práce. Následně studentka zodpověděla doplňující otázky.
Proběhla diskuze na téma práce. Studentka adekvátně a správně reagovala na vznesené dotazy členů komise. Komise se při hodnocení vlastní práce ztotožnila s návrhy posuzovatelů práce (vedoucího a oponenta) a dohodla se na výsledku obhajoby níže. Nicméně komise neshledala práci dostatečně inovativní pro udělení prémiového stipendia.